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最洪流平保证B细胞多样性

1-2周

卑劣义务

Throughput

杂交瘤、抗体文库及单B细胞挑选均是抗体创造的有效工具,且均有其各自的优势:杂交瘤技艺展开最为成熟、获得抗体分子多具有高亲和力;文库技艺则可以直接获得全人抗体序列且无需动物免疫、节省时间;而单B细胞挑选平台不但更好的保管B细胞多样性,同时在挑选听从方面独树一帜,假设将其与全人源小鼠的快速免疫相结合、或运用全愈病人的样本中止挑选,单B细胞挑选平台则最短可以在1个月拿到全人抗体分子。

免疫原准备

MicrofluidicChamber

Cellbasedassay

N

基于细胞的配体封闭实行

对称心客户需求的单B细胞中止单细胞VH/VL测序

Tip2:市场中单B细胞分选平台的比较

Low

Tip1:单B细胞分选平台有什么优势?

(Beacon™)

1周

市场中单B细胞分选技艺平台的比较

选项2:细胞免疫

重组抗体消耗

Microdroplets

*统统挑选均在一天完成,其他为数据分析、项目相反时间

必选

金斯瑞单B细胞分选平台

于细胞的抗原结合测试

质粒剖析

重组抗体消耗

High

基于Beacon™的单B细胞分选

3个月

High

选项3:DNA&免疫

82mappedtoadifferentepitopethanapositivecontrolantibody

蛋白标记

基于蛋白的其他实行(如种间交叉回声实行,额外的抗原结合测试)

免疫原准备

Y

抗原特异性结合检测

杂交瘤平台

Sensitivity

细胞断定(FACS)

适用于多跨膜靶点

基于细胞的表位作图

Medium

首页»

轻重链自然配对

效力内容

选项1:免疫(常规动物模型)

案例研讨

挑选通量为一张芯片

可选

DNA断定&基因枪

抗体源头

小鼠或人

选项2:免疫(人源化小鼠)

(1张芯片)

金斯瑞ProSpeed™单B细胞挑选效力

单B细胞挑选平台(SingleBCellScreeningPlatform),也可以称为B细胞克隆技艺(SingleBCellCloning),以微流控技艺为基础,直接对B细胞中止单细胞水平的分别,分析与挑选,从而精准、高效的挑选出分泌目标抗体分子的B细胞,再结合单细胞测序技艺,即可失失目标抗体序列。除了对动物中止免疫、作为肇始材料中止挑选以外,该技艺也可以运用全愈病人的PBMC作为肇始材料,或对全人转基因小鼠中止免疫,挑选后直接获得全人抗体序列。

直接从人外周血中挑选出全人抗体

1周

细胞断定

AssayCapability

细胞断定(FACS)

抗体药»

Low

 

金斯瑞单B细胞分选效力

基于细胞的种间交叉实行

IgG分泌检测

挑选通量为两张芯片,可获得更多有结合力的分子;尤其适宜应战性靶点项目。

差异抗体创造平台的比较

N/A

适用于可溶性/单跨膜靶点——DiamondPackage

对称心客户需求的单B细胞中止单细胞VH/VL测序

可选

单细胞测序

全人天然抗体文库

人源化

基于细胞的种间交叉实行

High

低阳性率:添加由于细胞融合步伐构成的多样性丧失

Proteinlabelling蛋白标记

IgG分泌检测

1-2周

基于蛋白的其他实行(如种间交叉回声实行,额外的抗原结合测试)

Multipletest

测序

相对较低

1天完成挑选

基于细胞的表位作图

Accuracy

High

基于细胞的表位作图

免疫原准备

基于Beacon™的单B细胞分选

Medium

24小时完成挑选

挑选周期

micro/nanowells

基于细胞的抗体封闭实行

1周

Y

项目

抗体表达与纯化

兼容人源样本品>

抗原特异性结合检测

SortingPlatform

IgG分泌检测

N

8-14周

测序

高阳性率:使用单B细胞挑选平台,在挑选早期阶段延迟锁定高质量抗体分子

8-14周

Proteinlabelling蛋白标记

亲和力成熟(部分)

基于细胞的抗原特异性结合测试

基于Beacon™的单B细胞分选

测序

N

必选

金斯瑞ProSpeed™单B细胞抗体药创造效力

Y

先导抗体分子创造»

项目

High

必选

亲和力

效力流程图

YorN

选项1:DNA免疫

Automation

周期

1-2个月

122beadbinder

Low

Y

Sufficient

FACS

延迟服从性挑选,多样性丧失最小化

1-2周*

挑选通量为两张芯片

Microengraved

Medium

抗体表达与纯化

重组抗体消耗

8-10周

Low

可选

效力特性

周期

单B细胞抗体药创造

免疫

*统统挑选均在一天完成,其他为数据分析、项目相反时间

基于细胞的种间交叉分析

在这一CaseStudy中,一张芯片中完成了8058个单B细胞的挑选,其中有122个Protein-binders,这其中有95个Cell-binders,82个可以识别与阳参抗体差异的表位。进一步检测创造,其中有35个B细胞分泌的抗体具有猴抗原交叉活性。

对应战性靶点有突出优势

基于细胞的配体封闭实行

*统统挑选均在一天完成,其他为数据分析、项目相反时间

High

35crossreactivetocynoantigen

Low

金斯瑞引进了BerkeleyLights公司的Beacon™单细胞光导系统(基于Micro-chamber的B细胞挑选平台),再加上在抗体药创造,细胞利用等方面的数十年丰盛的阅历以及完满的上卑劣平台,可以给客户提供一站式的单B细胞分选效力、用于中止抗体药开拓,为您的抗体药创造之旅保驾护航。

1天

效力内容

关于单B细胞有着多种差异分选机制,如今市面上存在基于FACS的分选、基于液滴微流控(Micro-droplet)的分选、基于微印记技艺(Micro-engrave)的分选和基于微流控小室(Micro-chamber)的分选机制(如Beacon™)。可以看出,各单B细胞平台都可以完成对单B细胞差异程度的高通量挑选,而基于微流控技艺的各平台也展现了其高矫捷度的优势。但能否更高效的运用于新型抗体分子的创造,in-chipassay的才干则是需求进一步思索的关键点。Beacon™可以完成in-chip的多重检测:不但可以完成基于蛋白的抗原抗体特异性结合检测,也可以使用抗原过表达细胞系检测抗体与细胞表面抗原的结合。除此以外,Beacon™可以完成更丰盛的服从性挑选,包括阻断实验、交叉活性,表位验证等。另外,不但检测典范多样,检测的矫捷度也极高,同时可以纪录静态的检测历程(可以察看到信号随时间的革新);准确度方面,由于Beacon™运用了光导技艺完成了对细胞的精准操控,卑劣验证明验中证明假阳性大大低于其他挑选平台的平均水平,阳性率抵达99%-100%。

95cellbinder

1-2周

选项1:免疫(常规动物模型)

周期

1-2周*

抗体表达与纯化

免疫

Y

10-12周

金斯瑞单B细胞挑选平台有才干在一天完成数万B细胞挑选,24小时内即可完成挑选义务,假设将其与全人源小鼠的快速免疫相结合、或运用全愈病人的样本中止挑选,单B细胞挑选平台则最短可以在1个月拿到全人抗体分子。2020年伊始,新型冠状病毒疫情牵动着每集团的心。金斯瑞承接了相应的应急抗体药物挑选项目。运用快速免疫的全人源小鼠,只用了不到12小时,即告成挑选出了特异性识别病毒蛋白和有潜力阻断病毒结合细胞受体的多个抗体。我们相信这一平台在未来将能助力更多开拓者,找到其心仪的先导抗体。CaseStudy

(2张芯片)

N

单B细胞挑选平台简介

8-10周

1/1000-1/2000

对称心客户需求的单B细胞中止单细胞VH/VL测序

基于细胞的抗原特异性结合测试

适用于可溶性/单跨膜靶点——GoldenPackage

最快1个月失失服从性抗体

免疫

项目

效力内容

N

1/10-4/10

选项2:免疫(人源化小鼠)

小鼠或人

(2张芯片)

Medium

1-2周*

B细胞多样性保管

时间周期短

适用于熏染性疾病研讨